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Physico-chemical characterization and microbiological quality evaluation of klila, an artisanal hard dried cheese from Algerian’s arid areas: Preliminary study

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Caracterisation physicochimique et qualite microbiologique du klila : un fromage traditionnel sec des regions arides d’Algerie : Etude preliminaire

 

A. MERIBAI 1

R. JENIDI 2

Y. HAMMOUCHE 1

A. BENSOLTANE 3

 

1 Laboratory of Characterization and Valorization of Natural Products (LCVNP), Faculty of Nature and Life Sciences, Earth and Universe (SNV-STU), University of El Bachir El-Ibrahimi, Bordj Bou Arreridj (34000), Algeria.

2 Faculty of Nature and Life Sciences, Earth and Universe (SNV-STU), University of El Bachir El-Ibrahimi, Bordj Bou Arreridj (34000), Algeria.

3 Laboratory of Food and Industrial Microbiology– Faculty of Biological Sciences- University of Oran. Algeria.

 

Abstract - Klila is an artisanal hard dried cheese, made from bovine, ovine or goat milk. This study aimed to evaluate physic-chemical and microbiological quality of twenty one Klila samples, including seven samples prepared from cow’s milk (V), seven from goat’s milk (Ch) and seven from sheep’s milk (Br), collected from various livestock farms in Bibans arid areas, in Bordj Bou-Arreridj region, North-eastern Algeria. Results Physicochemical tests gave average pH of 4,47, average acidity: 27,71°D, conductivity : 01,095 ms/cm, dry matter: 35,03% and ash : 0,34%. Microbiological analyzes average fecal flora (1,24× 103 CFU / g), fecal coliforms (0,84 CFU/g), indol- floras (0,32), fecal Streptococci (2,130 CFU/g). Conclusion: If sample’s hygiene levels were acceptable, exploration of lactic acid floras, protein and fat rates are desirable.

 

Keywords: Klila, Physico-chemicals Analysis, Bacteriological quality, Fecal flora, Streptococci.

 

Résumé - Klila est un fromage traditionnel dur, fabriqué à base de lait de vache, de brebis ou de chèvre. L’objectif de l’étude est d’évaluer les qualités physico-chimiques et microbiologiques d’un effectif de vingt et un échantillons de Klila dont sept sont préparés à base de lait de vache (V), sept de chèvre, (Ch) et sept de brebis (Br), collectés dans différentes fermes d’élevage de la région aride des Bibans, wilaya de Bordj Bou-Arreridj, Nord-Est algérien. Les tests physicochimiques ont donné des pH moyens de l’ordre de 4,47, une acidité moyenne de 27,71°D, une conductivité de 1,095 ms/cm, la matière sèche étant de 35,03% et le taux de cendres de 0,34%. Les analyses bactériologiques ont donné des charges moyennes en flore aérobie mésophile de 01,24 x103 UFC/g, les coliformes fécaux étant de 0,84UFC/g, les flores indologènes de 0,32 et les streptocoques fécaux de 2,13 UFC/g. Conclusion: Si les niveaux d’hygiène des échantillons se sont avérés acceptables, l’exploration des charges en flores lactiques et la détermination des taux de protéines et de matières grasses restent néanmoins sou haitables.

 

Mots clés: Klila, Analyses Physico-chimiques, Qualité microbiologique, Coliformes fécaux, Streptocoques.

 

  1. Introduction

En Algérie, la consommation des produits laitiers relève d’une longue histoire traditionnellement liée à l’activité d’élevage, les produits laitiers étant fabriqués par des processus artisanaux anciens, à partir du lait ou de mélanges de laits de différentes espèces. Il existe une variété de produits laitiers artisanaux (du terroir), leur dénomination ainsi que leur processus de fabrication différant d’une région à l’autre, ces produits diffèrent aussi par leur goût et leur consistance, selon la source du lait (vache, chèvre, brebis et chamelle). En matière de superficie, l’Algérie est le premier pays en Afrique, classé neuvième au monde, avec

2 281 741 Km2 (Nedjraoui et Bédrani 2008). Cependant, plus de 80% de cette superficie est un désert subissant une sècheresse récurrente (Chehma 2003). La région des Bibans dans la wilaya de Bordj Bou-Arreridj, se situe à 220 km à l’Est d’Alger. Elle s’étend sur l’axe Alger-Sétif-Constantine, possède 658.968 habitants, et a une superficie de 3920,42 km². L’altitude varie entre 302 et 1885 m. Elle est limitée au Nord par Béjaia, à l’Est par Sétif, au Sud par M’sila et à l’Ouest par Bouira. Le relief de la wilaya est composé de trois grandes zones: une zone de hautes plaines, une zone montagneuse et une zone steppique. Le climat est de type continental, aride en hiver, rigoureux sec et chaud en été. Le réseau hydrographique de la wilaya est caractérisé par deux sens d’écoulement opposés, séparés par une ligne de partage des eaux. Cette limite naturelle correspond à la limite des grands bassins versants de l’Oued Soummam et de Chott El-Hodna (Anonyme 2015).

En Algérie la production locale de lait ne couvre qu’environ 40% de la demande, estimée à plus de 4 milliards de litres, et essentiellement bovine (Belhadia et al. 2009; Meribai et al. 2016a). Selon les estimations du ministère algérien de l’Agriculture et du développement rural (MAADR), le lait des petits ruminants, caprins et ovins, pourrait être d’un grand appui à la filière lait, en état déficitaire (Belhadia et al. 2009; Meribai et al. 2016a; 2016b). La production du lait par ces trois espèces pourrait contribuer à hauteur de 25% de la totalité du lait collecté. Plusieurs travaux ont caractérisé des produits laitiers traditionnels algériens, à l’exemple du S’men; un beurre traditionnel fabriqué à partir du lait de chamelle dans le Sud de l’Algérie (Kacem et Karam 2006). Le Raib est un lait fermenté caillé (Mechai et Kirane 2008) et le d’han est obtenu à la fin du barattage du lait caillé de différentes espèces (Idoui et al. 2013; Guessas et al. 2012). Le l’ben est un lait fermenté, écrémé, traditionnel préparé par acidification spontanée du lait cru de vache, de brebis ou de chèvre sous l’action fermentaire des flores lactiques originelles (Samet-Bali et al. 2010). Parmi la longue liste des fromages traditionnels produits en Algérie, seuls le Djben et le Klila, sont connus (Hallel 2001). Le djben est un fromage frais algérien (El Marnissi et al. 2013), non affiné, préparé à partir du lait cru (Ouldabeid et al. 2013), consommé dans les 10 ou 15 jours après sa préparation. Il existe aussi le Bouhazza, un fromage traditionnel affiné, à pâte molle et épicée, non moulée, très répandu dans l’Est Algérien (Aissaoui-Zitoun et al. 2012; Marino et al. 2012). Le Michouna est un fromage frais fabriqué à partir du lait et du l’ben de vache ou de chèvre ou du mélange des deux (Derouiche et Zidoune 2015). Le Klila est un fromage traditionnel, consommé frais ou séché, préparé à base du l’ben de vache, brebis ou chèvre ou d'un mélange des trois. Son procédé empirique de fabrication, est encore en vigueur, et caractérisé par une fermentation spontanée des flores originelles du lait, à température ambiante. Après coagulation et égouttage, le produit est consommé à l’état frais (Mennane et al. 2007), ou après séchage pendant plusieurs semaines (Boubekri et Ohta 1996). Dans ce dernier cas, le produit est utilisé aussi comme ingrédient, après réhydratation dans diverses préparations culinaires. Peu de données scientifiques sont disponibles sur les caractéristiques biochimiques, microbiologiques et physico-chimiques de ce fromage traditionnel. De même, le procès de fabrication du Klila est mal élucidé, ce dernier semble différent d’une région à une autre. Le protocole archaïque est caractérisé par l’absence du traitement thermique du lait, l’usage d’instruments non stérilisés, sur des surfaces de travail non désinfectées, un personnel non qualifié, la filtration par des tissus non stériles et le séchage du produit à l’air libre où il y a prolifération de micro-organismes. De ce fait, le produit échappe à tout contrôle de qualité, ce qui constitue un risque potentiel pour la santé du consommateur.

Ainsi, la présente étude s’est fixé comme objectif principal la caractérisation des qualités physico-chimiques et microbiologiques de 21 échantillons de fromage traditionnel Klila préparé à base de lait fermenté, l’ben, provenant de trois espèces : bovine (07 échantillons), caprine (07 échantillons) et ovine (07 échantillons), collectés dans des foyers et de fermes d’élevage extensif dans la région de Bordj Bou Arreridj dans le Nord-est de l’Algérie durant la saison de grande lactation.

  1. Matériel et méthodes
    1. Origine des échantillons:

Un effectif de 21 échantillons du fromage Klila, séché, fabriqué à base de l’ben d’espèce bovine (07 échantillons), espèce caprine (07 échantillons) et d’espèce ovine (07 échantillons), a été collecté dans des fermes d’élevage mené à l’extensif et des foyers d’éleveurs, dans différentes localités de la région les Bibans, dans la wilaya de Bordj Bou Arreridj, Nord- Est algérien, en Mars- Avril.

    1. Analyses physico-chimiques :

Cinq tests ont été pratiqués afin de déterminer le pH, l’acidité en degré Dornic (ºD), la conductivité en millisiemens/centimètre (ms/cm), le taux de matière sèche (%) et le taux de cendres (%).

    1. Analyses microbiologiques:

Il s’agit de la réalisation d’estimations des charges moyennes microbiennes (dénombrement en ufc/gr*: unité formant colonies /gramme de fromage), des différentes flores et des deux espèces microbiennes (Salmonella sp et Staphylococcus sp), selon les protocoles préconisés par Corry et al. (2012). Le tableau 1 résume les protocoles suivis, les milieux de culture et d’enrichissement et la température optimale d’incubation utilisée. Les résultats ont été comparés aux normes Algériennes (Anonyme 1998)

 

 

Tableau 1 : Dénombrement des différentes flores et espèces microbiennes

 

Flores/ Dénombrement en UFC*/g

Milieu de culture utilisé/ Marque

Standards (Normes pour fromages) JORA.dz

Flores eucaryotes (Levures et moisissures aérobies)

Gélose Sabouraud/ IPA. Algérie. 05 jours/ à température ambiante

ND

Flore totale aérobie mésophile (F.T.A.M)

PCA/Plant Count Agar à 30°C/ Pronadisa. Spain. Après 48H à 30ºC

ND

Coliformes totaux

BLBVB*/37°C+ Cloche/ Pronadisa. Spain. 24H/ 37ºC

102

Coliformes fécaux et indologènes à 44.5ºC

BLBVB*/ 44.5°C+Cloche Test de Mc Kezy/ Pronadisa. Spain. 24H/ 44.5ºC

10

Streptocoques du groupe D

Milieu Rothe/ 37°C- (Test Présomptif). Litsky

(Test Confirmatif) Pronadisa. Spain. 24H/ 37ºC

10

Clostridium sulfito- réducteur (CSR*) (Spores+ formes végétatives)

Gélose. Viande foie/ Sulfite de Na+

Alun de fer à 37°C/ IPA. Algérie. 24H/ 48H jusqu’à 72H à 30ºC

01

Salmonella sp

Bouillon Muller Kauffman+ Gélose Hektoen/Idealab. Algérie. 24H/37ºC

00

Recherche de Staphylococcus sp

Bouillon Giolitti Cantoni Enrichissement

et Isolement sur Gélose Baird Parker/ Idealab. Algérie. 24H/37ºC

102

 

N.D Non déterminé, JORA.DZ : Journal Officiel de la République Algérienne Démocratique et Populaire (www.jora.dz- JO 35.1998)

 

  1. Résultats

Les résultats des tests physico chimiques avec les moyennes et écart types sont illustrés sur le tableau n : 2

  1. Discussion

Les analyses physico chimiques du Klila ont donné un pH moyen de 04.47 et une acidité moyenne de 27.71 °D, ces valeurs montrent bien l’acidité de ce fromage. A ce niveau, il est à signaler que le pH acide résulte de l’activité fermentaire des flores lactiques autochtones adaptées au fromage Klila (Tamime et O’Connor 1995; Abdelsalam et Benkerroum 2006; Pogacic et al. 2013). De même, Boubekri et Ohta (1996), pour deux échantillons de Klila collectés dans les hauts-plateaux de l’Est algérien (Sétif : K; Batna : K3) et séchés pendant quatre semaines, avaient noté que les espèces Enterococcus faecalis et Ec. faecium suivies de Lactobacillus sp dominent l’échantillon K1, alors que les espèces Pediococcus sp suivies de Leuconostoc sp, dominent l’échantillon K3. Leksir et Chemmam (2015) avaient noté, lors d’une étude menée sur un effectif de huit échantillons de Klila préparés à base de différents laits (vache, chèvre et brebis) collectés dans plusieurs localités de l’extrême Est algérien (Guelma, Souk Ahras et Oum El Bouaghi), des pH oscillant entre 04.35 et 04.99, des valeurs d’acidité de 24,3ºD à 54ºD, des taux d’humidité variant entre 7,00% et 9,13% et des taux de matière sèche de  90,87% à 90,98%. Nonobstant, Dahou et al. (2015) avaient noté un pH pour les fromages traditionnels frais J’ben issus de lait de brebis de 4,57, pour le J’ben de chèvre : 4,81 et un pH de 4,62 pour le J’ben du lait de vache.

 

Tableau 2 : Variation des valeurs relatives aux tests physico-chimiques

 

Echantillons

Tests physicochimiques

Es*

Ech.*

pH

Acid*(ºD)

Cond.*(ms/cm)

M.S*%

T.C.*%

Espèce Bovine (V)

V1

4,6

26

2,2

32,96

0,3

V2

4,1

42

1,7

26,48

0,26

V3

4,5

24

2,16*

37,56

0,6

V4

4,2

36

0,71

34,62

0,47

V5

4,4

33

0,82

25,74

0,31

V6

4

44

1,2

25

0,3

V7

4,4

38

2,9

48,48

0,25

Ecart type

m

0,21930627

7,58758384

1,01690298

8,38912334

0,12998168

Moyenne

M

4,31428571

34,7142857

1,58833333

32,9771429

0,35571429

Espece Caprine (Ch)

Ch1

4,6

23

0,42

36,68

0,58

Ch2

4,7

23

1,28

38,75

0,25

Ch3

4,5

24

1,01

28,32

0,46

Ch4

4,6

23

0,7

35,56

0,2

Ch5

4,6

23

0,83

36,61

0,32

Ch6

4,5

24

0,74

40,09

0,4

Ch7

4,7

21

0,77

32

0,26

Ecart type

m

1,0768642

1

0,268044

4,0420044

0,134748

Moyenne

M

4,6

23

0,82142857

35,43

0,35285714

Espèce Ovine (Br)

Br1

4,7

27

0,63

33,33

0,35

Br2

4,5

24

0,84

46,03

0,29

Br3

4,7

27

0,76

45,88

0,35

Br4

4,2

30

0,99

27,22

0,26

Br5

4,2

26

0,7

30,14

0,44

Br6

4,7

20

0,97

33,05

0,21

Br7

4,6

24

1,22

41,29

0,42

Ecart type

m

0,2267786

3,1547394

0,2026256

7,6373268

0,083552

Moyenne

M

4,51428571

25,4285714

0,87285714

36,7057143

0,33142857

MT des M

Mt

4,47619047

27,7142857

1,09420635

35,0376191

0,34666667

 

Es : Espèce, Ech* : Echantillon, Acid*(ºD) : Acidité en degré Dornic, Cond* : Conductivité en millisiemens/centimètre (ms/cm), M.S*(%) : Taux de matière sèche, T.C.*(%) : Taux de cendres, Mt : Moyenne totale

 


Tandis que les espèces
Enterococcus sp dominent les J’ben fabriqués à base de lait de brebis et de vache, les flores lactiques Lactobacillus sp dominent celui fabriqué avec du lait de chèvre. Pour un effectif de cinq échantillons de Klila, collectés dans les campagnes de la wilaya de Djelfa (Algérie), Guetouache et Guessas (2015) avaient noté que les pH varient de 3,8 à 4,8 avec une moyenne de 4,2 bien que l’acidité titrable, pour les mêmes échantillons, variait entre 68ºD et 91ºD, avec une moyenne de 79,4 ºD. A cet effet, les auteurs avaient relevé que les espèces Lactobacillus sp dominent cet écosystème fromager avec : Lactobacillus fermentum : 21.97%, Lb. plantarum : 18.94% et Lb casei : 18.18%. En outre, Mennane et al. (2007) avaient noté pour un ensemble de 23 échantillons de Klila frais au Maroc, des valeurs de pH variant entre 4,7et 3,8.

Les dénombrements des flores bactériennes, notamment celles indicatrices des contaminations (coliformes totaux, fécaux, flores indologènes et Streptocoques du groupe D), ont été enregistrés à de faibles taux (situées dans les normes), avec l’absence quasi-totale d’espèces pathogènes et/ou toxinogènes (Salmonella sp et Staphylococcus sp), traduisant ainsi des niveaux acceptables d’hygiène des laits fermentés utilisés (l’ben) comme matière première, de l’environnement de fabrication et de séchage. Vivegnis et al. (1998), lors d’une étude microbiologique ayant porté sur 153 échantillons de fromages fabriqués à base de lait cru, en Wallonie (Belgique), avaient relevé que les productions réalisées dans des ateliers de petite taille (à l’échelle artisanale), ont des niveaux de contamination inférieurs à ceux observés dans les productions issues des entreprises industrielles. Des travaux récents ont relevé les niveaux d’hygiène acceptables du Klila algérien (Guetouache et Guessas 2015; Leksir et Chemam 2015). Il semble que la texture extra-dure de ce produit artisanal, obtenue après séchage, ainsi que sa consistance granuleuse, ayant de faibles taux d’activité de l’eau, ont joué dans le sens de l’abolissement de toute prolifération des flores microbiennes.

  1. Conclusion

Le profil physico-chimique, après caractérisation, a montré que le Klila collecté dans la région de Bordj Bou Arreridj dans le Nord-Est algérien, est un fromage extra dur, ayant un pH acide (04,47), une acidité titrable moyenne de 28,37ºD, un taux de matière sèche de 35,37% et un taux de cendres de 0,33%. Les analyses microbiologiques ont révélé que ce produit du terroir est d’un niveau hygiénique acceptable. Pour l’approfondissement de la caractérisation, notamment biochimique du Klila, il serait souhaitable d’effectuer des tests d’exploration des charges en flores lactiques ainsi que la détermination des taux de protéines et de matières grasses.

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